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缓冲液CAPS、Bicine、HEPES等的电位滴定。

信息来源: http://www.hbjflhg.com/ 作者:湖北玖丰隆化工有限公司 发布时间:2021-08-24 17:12

  测定缓冲液含量的方法很多,其中电位滴定法是一种简单、快速的方法。强酸和强碱都是强电解质,在水溶液中完全电离,可以通过酸碱滴定直接完成。但是,生物缓冲液如CAPS、Bicine、武汉HEPES等。


  为什么缓冲液需要电位滴定


  缓冲液是具有两性性质的弱酸弱碱,不能像溶液中的强电解质那样完全电离。而且它们可以缓冲滴定过程中的pH变化,指示剂颜色突变不明显,很难判断滴定终点。该检测方法适用于反应平衡常数小、滴定突跳不明显、显色试剂和混浊试剂。


  电位滴定用缓冲试剂


  大多数缓冲区,如CAPS、Bicine、HEPES等。,是有机弱酸(Tris除外),可以用氢氧化钠标准溶液(强电解质)滴定,有的用碳酸钠滴定,但它是弱电解质。可以用浓度或含量恒定的缓冲液,如CAPS标准溶液,用NaOH电位滴定法做标准曲线,然后就可以测量未知浓度的CAPS。


  缓冲液在溶液中部分解离,解离度可以通过平衡常数和加入溶液中的弱酸和强酸的量来计算。公式为pH = pKa+对数([A]/[HA]),其中pKa为该实验温度下缓冲液的解离常数,[A]/[HA]为解离度,以CAPS为例,表示为CAPS阴离子与CAPS分子的比值。该方程在弱酸滴定的缓冲区非常有用,在一定溶液的离子强度下,pKa为-logKa。


  需要注意的是,NAOH溶液是强碱,有很强的腐蚀作用,所以可以避免接触手或衣服,会腐蚀玻璃,所以玻璃仪器要及时清洗。其他缓冲区可能有多个跳转点。例如PIPES中的两个乙磺酸基团不是一元酸,CAPS中的丙磺酸基团反应后,持续滴加NaOH可能与CAPS上的氨基发生反应,改变电位。


  除电位滴定法外,缓冲液常采用液相色谱法测定,如德胜生产的Tris缓冲液,其主要含量在实验室用HPLC测定。当然,不同的测定方法各有优势,不同的检测方法可以测定不同的缓冲液。


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